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BD LSRII 儀器規格設備 3-laser, 11 color |
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Excitation Laser |
Detection Filter |
example |
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488nm Blue Laser |
530/30 |
Alexa Fluor 488, FITC, BB515 |
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575/26 |
PE |
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610/20 |
PE-Texas Red |
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660/20 |
PE-Cy5 |
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695/40 |
PI, PerCP, PerCP-Cy5.5, BB700, 7-AAD |
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780/60 |
PE-Cy7 |
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633nm Red Laser |
670/30 |
APC, Alexa Fluor 647 |
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730/45 |
Alexa Fluor 700 |
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780/60 |
APC-Cy7, APC-H7 |
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405nm Violet Laser |
450/50 |
Alexa Fluor 405, V450, BV421, PB |
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525/50 |
Alexa Fluor 430, V500, BV510 |
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檢體置備之注意事項:
(1) 建議樣本濃度: 1x106 cells /ml
(2) 檢體上樣前過篩
(3) 上樣管僅可使用 PS 材質 (BD Cat. No.352052) 之 5mL Falcon 管上機
檢體或細胞樣本在上機之前需要用40 μm的篩網過濾(BD Cat. No. 352340) 或含篩網蓋試管(BD Cat. No. 352235)，過濾後細胞建議繼續避光冰浴保存。
實驗範例
8 色細胞表型及細胞內染分析
使用八色螢光進行細胞表型分析，最大化提供細胞資訊，分析CMV-Response 受試者CD8 毒殺型T 細胞及CD4輔助型T細胞的干擾素 IFN-γ的表達。
免疫表型分析
使用螢光標記的單株抗體標記細胞表面標誌，來判斷細胞發育階段，是流式技術最主要的應用之一。結合單株抗體標記細胞表面標誌及細胞內激素表達，也是在流式細胞術中常見的應用，將PBMC加入SEB 刺激，在利用BFA 蛋白轉運抑制劑將細胞激素IFN-γ留在細胞內，以利結合細胞表色及細胞內染進而來探討細胞作用.